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組蛋白的持續磷酸化是指在某些細胞條件或刺激下,組蛋白上特定氨基酸殘基(通常是絲氨酸或蘇氨酸)發生的連續或長時間的磷酸化。這種磷酸化通常由特定的激酶(如蛋白激酶A、蛋白激酶C或MAP激酶)催化,並且可以被磷酸酶逆轉。組蛋白的持續磷酸化在調控基因表達、細胞週期進程、DNA修復和其他細胞信號傳導過
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組蛋白的翻譯後修飾(Post-translational modifications, PTMs)是對蛋白質結構的重要調節,它們在調控基因表達、DNA修復、細胞信號傳導等方面發揮關鍵作用。組蛋白PTMs可以通過添加或移除不同的化學基團或蛋白質實現,從而影響染色質結構和功能。以下是一些常見的組
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組蛋白修飾檢測的核心原理是通過實驗手段來鑑定組蛋白上不同修飾位點的存在和位置。質譜是最常見鑒定翻譯後修飾的方法,尤其是LC-MS/MS,可以高通量地分析組蛋白樣品。 1.組蛋白提取:首先,需要從生物樣本中提取組蛋白。這可以通過細胞抽提或組織抽提等方法來實現。 2.化學標記或抗體富集:提取的組
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質譜分析是生物化學和生物學研究中的一項關鍵技術,已經成爲解析生物大分子結構和功能的不可或缺的工具之一。其中,磷酸化是生物學研究中一個重要的研究領域,涉及到調控細胞信號傳導、細胞週期調控、代謝調控等衆多生命過程。本文將探討質譜分析在磷酸化研究中的應用,以及其在生物醫學領域中的潛在影響。 磷酸
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質譜檢測是分析蛋白質翻譯後修飾(PTM)的重要工具。翻譯後修飾是指在蛋白質合成後發生的各種化學改變,這些改變對蛋白質的功能、定位和活性有重大影響。常見的翻譯後修飾包括磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化等。 在質譜分析中,蛋白質樣本首先通過酶切被分解成較短的肽段。這些肽段被送入質譜儀,在其中被電
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組蛋白是核心的組成染色質的蛋白質,它們通過翻譯後修飾在基因表達調控中發揮重要作用。常見的組蛋白修飾包括: 乙酰化: 主要發生在賴氨酸殘基上,與基因的激活密切相關。 甲基化: 通常發生在賴氨酸和精氨酸殘基上,可以導致基因沉默或激活,取決於甲基化的位點和程度。 磷酸化: 通常與染色質重塑和D
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定量蛋白組學與磷酸化蛋白質組學聯合分析是一種綜合利用多種生物信息學和實驗技術來研究細胞或生物樣本中的蛋白質表達和磷酸化狀態的方法。 1、定量蛋白組學:定量蛋白質組學通常使用質譜技術,如液相色譜-質譜聯用(LC-MS)。通過將樣本中的蛋白質消化成肽段,並使用質譜儀測定這些肽段的質譜峯,可以確
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蛋白質甲基化修飾測序是一種用於檢測和分析蛋白質上的甲基化修飾的生物技術方法。這種修飾通常涉及將甲基團(-CH3)加到蛋白質的特定氨基酸殘基上,這在調控蛋白質功能和細胞過程中起着重要作用。 常規步驟: 樣品準備:從生物樣品中提取蛋白質。 酶解:使用酶(如胰蛋白酶)將
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二硫鍵(Disulfide bonds)和巰基(Thiol groups)的檢測是生物化學和分子生物學中的一個重要話題。這些化學結構在蛋白質的結構和功能中扮演着關鍵角色。 下面是幾種常用的檢測方法: 一、二硫鍵的檢測: Ellman's Test:這是一種常
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常用的泛素化蛋白富集方法主要包括: 1、抗泛素抗體富集:這是最常見的泛素化蛋白富集方法之一。研究人員使用具有高親和力的抗泛素抗體,將其結合到泛素化蛋白上,然後通過免疫沉澱或親和層析等方法將泛素化蛋白與抗體結合,隨後可以用於進一步的分析,如質譜鑑定或蛋白質親和實驗。這些抗體可以特異性地識別並
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