O-糖分析服務
糖基化分析是最具挑戰性的翻譯後修飾分析之一。糖基化修飾通常是以基團為單位,而非單個修飾。即使是蛋白質上的單個糖基化位點,也可能具有不同的鏈長和連線不同分支的多種聚糖異構體。O-糖基化(O-Glycan,也稱O糖,O聚糖)主要透過末端單糖殘基與絲氨酸或蘇氨酸的OH基之間的糖苷鍵與多肽連線。O糖連線的氨基酸的共有序列尚不清楚,且O糖的結構多樣,可以分為具有相對異質核心結構的幾個結構家族。
與N-糖不同的是,目前還沒有能消化大多數O糖的通用酶。O-聚糖酶僅可酶解未被取代的O-GalNAc雙糖起始的聚糖。因此,透過化學法對O-聚糖進行水解是更通用的方法,大部分O-聚糖可從O-糖肽釋放,即β-脫除。
可使用MALDI-TOF MS對O-聚糖進行分析,透過對衍生化反應後甲基化的O-聚糖進行分析,從而將所有羥基轉化為甲基醚,並透過對羧基上的唾液酸進行甲酯化進行穩定後,使得MALDI TOF MS可以在正離子模式下對O-糖進行分析。對甲基化的O-糖進行質譜分析,便可獲得有關聚糖組成的資訊。
百泰派克生物科技在糖組學領域擁多年分析服務經驗,可根據您的具體需求量身定製糖組學分析服務。歡迎諮詢!
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜引數(中英文)
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O-連線聚糖的不同核心結構
與N-糖不同的是,目前還沒有能消化大多數O糖的通用酶。O-聚糖酶僅可酶解未被取代的O-GalNAc雙糖起始的聚糖。因此,透過化學法對O-聚糖進行水解是更通用的方法,大部分O-聚糖可從O-糖肽釋放,即β-脫除。
糖分析中樣品製備的一般流程
可使用MALDI-TOF MS對O-聚糖進行分析,透過對衍生化反應後甲基化的O-聚糖進行分析,從而將所有羥基轉化為甲基醚,並透過對羧基上的唾液酸進行甲酯化進行穩定後,使得MALDI TOF MS可以在正離子模式下對O-糖進行分析。對甲基化的O-糖進行質譜分析,便可獲得有關聚糖組成的資訊。
基於質譜的O聚糖分析示意圖
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中/英文專案報告
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3. 質譜圖片
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O-糖分析一站式服務
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