蛋白質甲基化修飾測序是一種用於檢測和分析蛋白質上的甲基化修飾的生物技術方法。這種修飾通常涉及將甲基團(-CH3)加到蛋白質的特定氨基酸殘基上,這在調控蛋白質功能和細胞過程中起著重要作用。
常規步驟:
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樣品準備:從生物樣品中提取蛋白質。
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酶解:使用酶(如胰蛋白酶)將蛋白質切割成較短的片段,以便於後續分析。
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親和純化:使用特定於甲基化位點的抗體來富集甲基化的蛋白質或肽段。
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質譜分析:使用質譜儀測量純化的肽段,以識別甲基化的位置和程度。
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資料分析:透過生物資訊學工具分析質譜資料,確定甲基化位點並研究其生物學意義。
圖1. 甲基化定量蛋白組學研究
蛋白甲基化修飾測序結合了親和純化、質譜等方法,能詳細鑑定甲基化位點,有助於理解蛋白質功能調控、訊號傳導路徑、以及疾病狀態下的蛋白質表達變化。其優點在於能提供精確的修飾圖譜,但缺點是裝置成本高,技術操作複雜,且對樣品量有一定要求。隨著技術的進步,其分析能力和應用範圍不斷擴大,在癌症研究、神經科學和表觀遺傳學等領域尤其重要。
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