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抗體測序是一種用於確定單克隆抗體或多克隆抗體中特定抗體分子的氨基酸序列的技術,這爲了解抗體的特異性、活性、結構和與抗原的親和力提供了關鍵信息,對於抗體工程、疫苗開發、疾病診斷和治療研究非常重要。質譜法是抗體測序的金標準,本期我們也主要介紹基於質譜法進行抗體測序的基本流程。 1.樣品準備:
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蛋白質de novo測序(從頭測序)是指不依賴已知的蛋白質數據庫,直接確定蛋白質的氨基酸序列。與其他一些分析方法依賴於已知的蛋白質序列數據庫或已知的質譜數據庫不同,從頭測序利用串聯質譜根據肽的碎片特徵進行直接分析。因此,蛋白質數據庫中未包含的肽序列、新物種的蛋白質序列以及基因組尚未測序的蛋白
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在現代藥物研發領域,蛋白多肽類藥物的質譜分析是一個至關重要的步驟。這種分析不僅有助於理解藥物的分子結構,還確保了其安全性和有效性。隨着生物技術的快速發展,蛋白多肽類藥物成爲治療各種疾病的重要手段,而質譜分析則提供了必要的分子層面信息。 圖1 質譜法表徵合成多肽 1.蛋白多肽類
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N-糖譜分析(N-glycan profiling)是一種用於分析蛋白質N-連結型糖鏈結構和組成的技術。這種糖鏈是一類共有的生物大分子,廣泛存在於真核生物中,特別是在細胞表面和分泌蛋白質中。N-糖譜分析對於理解蛋白質的功能、細胞信號傳導、細胞識別和疾病發生機制至關重要。 一、N-糖譜分析基
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O-GlcNAc糖基化檢測是一種用於檢測和分析蛋白質上的O-連接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)修飾的方法。O-GlcNAc是一種動態的、可逆的糖基化形式,對多種細胞過程,包括信號傳導、轉錄調控和細胞應答機制等,都有重要作用。 圖1. O-連接聚糖的不同核心結構 以下是O-GlcNA
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蛋白質定量標籤,如Tandem Mass Tag(TMT)和Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation(iTRAQ),是用於質譜分析中的化學標籤,它們允許同時定量比較多個樣本中的蛋白質表達。這些標籤通過共價鍵連接到樣本中的肽段上,
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TMT (Tandem Mass Tag) 標記定量蛋白質組學是一種先進的質譜技術,用於定量分析不同樣本中的蛋白質表達差異。這種技術的核心是使用TMT標籤來標記蛋白樣本。在此過程中,來自不同條件或處理的蛋白樣本被分別與不同的TMT標籤結合。這些標籤質量不同,但結構相似,這允許在質譜分析中區分
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毛細管電泳(Capillary Electrophoresis, CE)是一種在電場作用下,利用液體介質中的分子或離子在毛細管中遷移的速度差異來實現分離的技術。這種方法具有高效率、高分辨率和快速分析的特點,廣泛應用於生物化學、分子生物學、藥物分析等領域。 1、工作原理 毛細管電泳基於分子或
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蛋白質的等電點(pI,Isoelectric Point)是指蛋白質在不帶電的狀態下,其電荷淨值爲零的pH值。換句話說,等電點是蛋白質分子在不帶正電荷或負電荷時的 pH 值。蛋白質的等電點是由其氨基酸組成和其氨基酸的pKa(酸性常數)值所決定的。 1.氨基酸組成: 蛋白質的等電點受其氨基酸
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中藥材蛋白質測定主要用於評估中藥材中蛋白質的含量,這對於瞭解藥材的營養價值、藥效成分及其質量控制非常重要。以下是一些常見的用於中藥材蛋白質測定的方法: 1.凱氏定氮法: 凱氏定氮法是一種傳統的蛋白質含量測定方法,通過測定樣品中的總氮含量來間接推算蛋白質含量。該方法包括樣品的酸性
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