N-糖基化位點分析

N-糖基化是一種涉及多種生理和病理過程的蛋白翻譯後修飾。糖基化修飾位點的可變性是細胞活性的關鍵指標，血清蛋白糖基化附著位點的減少與先天性糖基化疾病(CDGs)的嚴重程度之間的相關性證明了這一點。因此，爲了充分了解蛋白糖基化對人體健康的影響，準確確定位點佔用率具有重要意義。

爲了確定糖基化附著位點，通常在重水裏麵使用蛋白n-糖苷酶F（PNGase F）從蛋白質中分離多糖，在此過程中，原先糖基化的天冬醯胺經歷脫醯胺化成為天冬氨酸，增加O18修飾。因為引入O18後分子質量發生變化，糖基化位點可以透過比較含有天冬氨酸的肽與含有非糖基化的天冬醯胺的肽進行檢測。分析糖蛋白中可變N-糖基化位點的一般策略包括蛋白質使用PNGaseF酶消化、聚糖釋放、液相色譜法分離糖肽和質譜檢測。




基於LC-MS的N-糖基化位點附著一般分析流程

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1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜引數（中英文）
3. 質譜圖片
4. 原始資料
5. 鑑定的糖基化位點的詳細資訊
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