翻譯後修飾蛋白組分析

    蛋白質翻譯後修飾(PTMs)是指蛋白質在翻譯中或翻譯後的化學修飾過程。蛋白質翻譯後修飾(PTMs)透過給蛋白質新增磷酸酯、乙酸酯、醯胺基或甲基等官能團增加蛋白質組的功能多樣性,並影響正常細胞生物學和發病機理的幾乎所有方面。蛋白質翻譯後修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質降解、訊號傳導和調節過程、基因表達調節以及蛋白質相互作用。蛋白質翻譯後修飾PTMs通常包括磷酸化、糖基化、泛素化、亞硝基化、甲基化、乙醯化、脂質化和蛋白水解。因此,PTM的特徵(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。

    蛋白質翻譯後修飾(PTMs)受許多因素影響,鑑定過程比較繁瑣。例如:大多數翻譯後修飾水平很低。因此,在鑑定之前必須對修飾蛋白進行富集。此外,修飾的穩定性以及質譜的檢測效率也是PTMs分析過程中的關鍵因素。百泰派克生物科技搭建有高階的分析平臺,可用於表徵各種翻譯後修飾(PTM)。

    BTP-蛋白質翻譯後修飾鑑定能夠解決的生物學問題

    百泰派克公司採用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺,Orbitrap Fusion質譜平臺,Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,為廣大科研工作者提供磷酸化/糖基化/泛素化/乙醯化/甲基化/二硫鍵/亞硝基化等翻譯後修飾鑑定。

    蛋白質氨基酸序列的特定位置可以與化學基團或者小分子量的蛋白共價結合從而發生蛋白質翻譯後修飾(post-translational modifications,PTMs),相較於沒有發生修飾的蛋白,PTMs會導致特定序列分子量的增加。在蛋白翻譯後修飾方式的鑑定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然後進入質譜進行分析;透過質譜分析,得到的是一系列肽段的分子質量資訊。對於某一個特定肽段而言,在沒有發生任何翻譯後修飾的情況下,其序列資訊和分子量是確定的;

    蛋白質翻譯後修飾方式鑑定示意圖

    蛋白質翻譯後修飾方式鑑定示意圖


    當它發生了某種翻譯後修飾之後,例如磷酸化修飾,由於序列資訊和分子量是確定的,磷酸根的分子量也是確定的;在質譜檢測過程中發現其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,假設這個肽段就發生了磷酸化修飾,再透過二級質譜圖進行二次確認。

    各類PTMs的常見功能

    PTMs的常見功能

    PTMs的常見功能

     

    研究案例

    該專案是中國科學院生物物理所一位老師Co-IP樣品在百泰派克進行蛋白泛素化修飾位點鑑定。得到的部分結果如下圖所示:

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    蛋白質翻譯後修飾方式鑑定研究案例

     

    BTP提供以下蛋白質翻譯後修飾鑑定分析服務

     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     

    中/英文專案報告

    在技術報告中,百泰派克生物科技會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜引數(中英文)
    3. 翻譯後修飾位點資訊
    4. 原始資料
    5. 生物資訊學分析

    一站式服務

    您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告

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