O-糖基化位點分析
與N-聚糖不同,O-聚糖是一種較小的高度多樣化的支鏈碳水化合物分子,可附著在不同蛋白結構上。這一特性導致了分析的複雜性,對O-糖基化位點進行分析也十分困難。糖基化位點的可變性是細胞活性的關鍵指標,血清蛋白糖基化位點附著的減少與先天性糖基化疾病(CDGs)的嚴重程度之間的相關性證明了這一點。因此,爲了充分了解蛋白糖基化對人體健康的影響,準確確定位點佔用率具有重要意義。
O-糖基化位點分析的一般步驟包括糖蛋白的蛋白水解消化、親水性相互作用液相色譜法對糖肽的富集和分離。可使用反相液相色譜-離子阱質譜聯用質譜分析富集的O-糖肽。
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O-糖基化位點分析的一般步驟包括糖蛋白的蛋白水解消化、親水性相互作用液相色譜法對糖肽的富集和分離。可使用反相液相色譜-離子阱質譜聯用質譜分析富集的O-糖肽。
O-糖基化位點附著一般分析流程
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