平行反應監測PRM服務
平行反應監測(PRM)是一種基於高解析度和高精度質譜的離子監測技術。PRM技術的原理與SRM/MRM的原理類似,但在分析方法的開發中,PRM更常用於對蛋白質和多肽進行絕對定量。PRM技術能實現複雜樣品中的attomole級別的多種蛋白質的檢測。
PRM是以Q-Orbitrap為基礎的四極杆高解析度質譜檢測平臺。與SRM每次執行一次躍遷不同,PRM透過前體離子對每次躍遷執行全掃描,也就是說,同時監控前體離子的所有碎片:首先,PRM採用四極(Q1)選擇前驅體離子,選擇範圍一般為m/z ≤ 2;然後,前體離子在碰撞細胞中破碎(Q2);最後,Orbitrap取代Q3,高解析度和高精度的掃描所有破碎的離子。因此,PRM技術不僅具有SRM/MRM目標的定量分析能力,而且還具有定效能力。
2.對產物離子進行全掃描,無需選擇離子對,更易於分析方法的建立;
3.較寬的線性範圍:增加到5-6個數量級。
• 高產量;
• 分析方法更易於開發。
2.質譜分析:水解後的樣品,使用Thermo公司最新的Obitrap Fusion Lumos質譜儀對樣品進行質譜分析。
3.資料分析:使用Skyline軟體進行資料分析。
• Label Free無標記差異蛋白的驗證;
• 多肽和蛋白質絕對定量;
• 量化疾病指標,建立診斷模型;
• 磷酸化蛋白定量,甲基化蛋白定量;
• 其他翻譯後修飾蛋白質定量;
• 代謝通路定量分析。
平行反應監測(PRM)
PRM是以Q-Orbitrap為基礎的四極杆高解析度質譜檢測平臺。與SRM每次執行一次躍遷不同,PRM透過前體離子對每次躍遷執行全掃描,也就是說,同時監控前體離子的所有碎片:首先,PRM採用四極(Q1)選擇前驅體離子,選擇範圍一般為m/z ≤ 2;然後,前體離子在碰撞細胞中破碎(Q2);最後,Orbitrap取代Q3,高解析度和高精度的掃描所有破碎的離子。因此,PRM技術不僅具有SRM/MRM目標的定量分析能力,而且還具有定效能力。
PRM的優勢
1.質量精度可達到ppm級別,比SRM/MRM更好的消除了背景干擾和假陽性問題,有效提高複雜背景下的檢測限和靈敏度;2.對產物離子進行全掃描,無需選擇離子對,更易於分析方法的建立;
3.較寬的線性範圍:增加到5-6個數量級。
SRM/MRM技術的優勢
• 高靈敏度;• 高產量;
• 分析方法更易於開發。
百泰派克生物科技平行反應監測PRM分析主要流程:
1.PRM分析法開發:首先,從質譜庫中生成或Skyline軟體中選擇2種或3種靶向肽。所選的肽對於目標蛋白質應該是唯一的,易於透過LC-MS進行的檢測,不能有缺失的切割位點和多次修飾的氨基酸。其次,根據x軸-濃度比,y軸-峰面積比,建立一條標準曲線。2.質譜分析:水解後的樣品,使用Thermo公司最新的Obitrap Fusion Lumos質譜儀對樣品進行質譜分析。
3.資料分析:使用Skyline軟體進行資料分析。
PRM的應用
• iTRAQ中差異蛋白的驗證;• Label Free無標記差異蛋白的驗證;
• 多肽和蛋白質絕對定量;
• 量化疾病指標,建立診斷模型;
• 磷酸化蛋白定量,甲基化蛋白定量;
• 其他翻譯後修飾蛋白質定量;
• 代謝通路定量分析。
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