2D-DIGE定量蛋白質組學
2D-DIGE(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis),即雙向熒光差異凝膠電泳,是在傳統雙向電泳的基礎上發展而來的新型蛋白質組學定量技術。2D-DIGE分離混合蛋白質的原理與雙向電泳一致,利用蛋白質的等電點和分子量的差異來分離蛋白質混合物,同時應用熒光染料的靈敏度及內標等技術,使其在定量蛋白質組學的研究中效果明顯優於傳統雙向電泳。DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它們能與蛋白質的賴氨酸側鏈氨基反應而使蛋白質被標記,被標記的蛋白質等電點和分子量不受影響,等量混合標記好的蛋白質後進行雙向電泳,不同凝膠之間可以透過cy2內標匹配,消除凝膠之間的差異,蛋白質表達量的變化則透過cy3和cy5不同熒光的強度來體現。2D-DIGE作為定量蛋白組學的經典方法,應用範圍廣,且適用於各種樣本。
2D-DIGE定量蛋白質組學
百泰派克生物科技提供SDS-PAGE和2D-DIGE電泳服務,結合Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺與nanoLC-MS/MS納升色譜,為廣大科研工作者提供一站式蛋白質組定性及定量服務。
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應用範圍
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