單細胞分析FAQ彙總
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• 什麼是質譜流式成像(Imaging Mass Cytometry,IMC)?
質譜流成像是一種基於質譜儀的組織成像平臺,它使用高分辨率激光燒蝕,然後將燒蝕的材料轉移到質譜儀,對金屬離子進行飛行時間質譜檢測,以生成高維圖像數據,可以對目標蛋白表達、細胞類型、它們的功能狀態和空間相互作用進行全面分析。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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免疫熒光(Immunofluorescence,IF)基於被一種波長激發並以更長波長髮射的熒光團來成像。使用 IF的多重研究受到大多數有機熒光染料的寬發射光譜的挑戰,導致各通道之間有重疊或串擾,這限制了可以同時測量的目標蛋白的數量。 質譜流式成像(Imaging Mass Cytometry
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憑藉1µm的激光束尺寸,IMC能夠以亞細胞空間分辨率對組織進行可視化和分析(典型的免疫細胞直徑爲5-7微米)。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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通常來自任何生物體的任何組織都可進行IMC分析,這些組織可以輕鬆切片到 4-5 µm,並且具有可用於細胞標記的已知抗體。IMC與OCT嵌入式冷凍切片和FFPE切片兼容。對於FFPE類臨牀病理學樣本, 爲了獲得最佳的IMC檢測性能,應在冷缺血條件下適當固定FFPE組織,冷缺血時間少於1小時。使
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除了用B5固定的骨髓樣本外都可以進行IMC研究。由於不同的脫鈣方法會導致某些抗體的功能不同,因此在用於實驗樣品之前,應在適當的對照組織上驗證所有抗體。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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用於IHC的任何類型的25x75mm帶電載玻片都與IMC兼容。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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爲了獲得最佳的單細胞分辨率,組織切片應在4-5µm範圍內切割,儘管常規運行高達10 µm的切片沒有問題,但單細胞分辨率可能會受到影響。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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爲獲得最佳數據質量,組織切片應新鮮切割,或最多在IMC染色之日前一週內切割。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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根據我們的經驗,經過IMC染色的組織切片可穩定保持長達一年,而不會出現明顯的信號衰減。爲確保長期穩定性,所有染色的載玻片必須儘可能乾燥,最好用乾燥劑真空密封。相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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• IMC分析中的感興趣區域 (Regions of Interest,ROI)指什麼?
感興趣區域即載玻片上組織的特定區域,這些區域捕獲了所研究疾病的基本結構和功能異質性。 通常使用該區域進行消融以生成IMC數據。 相關服務:單細胞質譜流式技術分析
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