分子量約爲29KD的目標蛋白通過WB進行鑑定,是否可以直接運行單向 SDS-PAGE,然後切膠進行肽質量指紋圖譜(PMF)?
使用 SDS-PAGE 分離然後切膠進行 PMF 是完全可行的。但是PMF比對是肽圖譜,存在一定的假陽性機率,所以對蛋白純度要求比較嚴格。因此,建議將 SDS 凝膠跑掉,以確保切出的蛋白凝膠不受其他蛋白凝膠的影響。另外,切膠時要注意不要被角蛋白等雜蛋白汙染。PMF鑑定效率高於N端測序,且價格更低。如果蛋白質的數量和純度足夠,PMF結果將同樣可信。
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