如何提取皮膚脂質Cer FFA Chor
- 將均質後的樣品與甲醇/氯仿/水混合溶劑充分混合。
- 震盪混合樣品數小時或過夜，確保脂質的充分提取。
- 離心分離，通常會形成兩層，脂質主要存在於氯仿相（下層）。
以下是提取面板脂質的大致流程：
1.樣品採集：
首先，從面板表面採集樣品。可以透過刮取、使用帶有溶劑的拭子或其他方法完成。如樣品為凍存的面板組織，需在低溫下切割成小塊以便於後續處理。
2.均質化：
使用均質器（如珠磨機或超聲破碎機）在冷凍條件下對面板樣品進行均質化，確保脂質充分釋放。
3.提取液配製：
通常使用的是雙相溶劑系統，比如甲醇/氯仿/水的混合溶劑。一個常用比例是甲醇:氯仿:水 = 2:1:0.8。
4.提取：
5.收集脂質相：
小心地抽取下層的氯仿相，避免擾動上層。
6.清洗：
可能需要對提取的脂質相進行一次或多次清洗以去除雜質。這可以透過加入甲醇和水，再次離心實現。
7.濃縮：
使用旋轉蒸發器或氮吹儀在低溫下蒸發掉溶劑，得到粗提脂質。
8.脂質的分離和純化：
使用薄層色譜（TLC）或液相色譜（HPLC）等技術根據脂質類別分離純化Cer, FFA, 和Chol。
以上每一步驟的具體條件（如溶劑的種類和比例、離心速度和時間、色譜條件等）需要根據具體的樣品和目標脂質進行最佳化。此外，整個過程中需要注意防止樣品的汙染和脂質的氧化。
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