單細胞質譜流式技術分析:體積和尺寸怎麼測量,什麼原理?
單細胞質譜流式技術(single-cell mass cytometry,簡稱 CyTOF) 結合了流式細胞儀和質譜技術,主要是用於分析細胞表面和細胞內的分子, 流式細胞儀(Flow Cytometry)可以實現細胞的體積和尺寸測量,其透過鐳射或其他光源來檢測流經流道的單個細胞,並可以測量不同的物理和化學特性,細胞體積和尺寸的測量主要基於以下原理:
1.前向散射(Forward Scatter,FSC):
FSC與細胞的大小有關。當流式細胞儀中的鐳射束照射到細胞時,細胞會將一部分鐳射散射在前方。大的細胞會散射更多的光,因此FSC通常用來估算細胞的大小。
2.側向散射(Side Scatter,SSC):
SSC與細胞的複雜性或顆粒度有關。鐳射束照射到細胞後,細胞內的顆粒會將光散射到側面。SSC可以用來估算細胞的顆粒度或內部結構的複雜性。
3.染料測量:
有些流式細胞術可以透過染料來測量細胞的體積。這些染料可以與細胞質有選擇性地結合,並且結合的量與細胞體積成正比。透過測量熒光強度,可以估算細胞的體積。
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