如何解讀 elisa 檢測方法?
ELISA(酶聯免疫吸附測定)是一種常用於檢測和量化蛋白質、激素、抗體和其他分子的實驗方法。下面我們從基本原理、結果判定以及注意事項三個方面對ELISA法進行解讀:
1.基本原理:
ELISA依賴於抗原-抗體的特異性結合。通常,一個已知的抗體或抗原會固定在微孔板上,然後新增待測樣品。如果待測樣品中含有對應的抗體或抗原,它們會與固定的分子結合。接著新增與待測物有親和力的、標記有酶的二抗。最後,加入酶的底物,發生顏色反應。根據顏色深淺或發光強度,可以定量或定性地測定待測物的濃度。
2.結果判定:
定性ELISA:簡單地確定樣品中是否存在目標分子。如果存在顏色反應,說明待測物存在。
定量ELISA:透過構建標準曲線來定量待測物。首先使用已知濃度的標準物質進行ELISA,得到一系列顏色反應。然後根據這些資料點繪製標準曲線。待測樣品的濃度可以透過其顏色強度與標準曲線對比得到。
3.注意事項:
操作要規範,以減少交叉汙染和誤差。
確保所有試劑和裝置均處於良好狀態。
標準曲線的構建和測定要精確,以保證待測樣品的濃度準確。
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