WB的泳道背景比較黑,接近灰色是爲什麼啊?
Western blot泳道背景變黑或接近灰色通常是由於以下幾個原因造成的:
1.過度曝光:
如果曝光時間太長,膠片或成像系統可能會捕捉到過多的訊號,導致背景變暗。
2.膜處理不當:
在轉移或阻斷步驟中,如果膜處理不當,比如阻斷不充分,可能會導致非特異性結合,使背景變暗。
3.抗體濃度過高:
主抗體或次抗體濃度過高也會增加背景訊號。
4.洗滌不充分:
如果洗滌步驟不充分,殘留的抗體或檢測試劑可能會增加背景。
解決這個問題通常需要最佳化實驗條件,如調整曝光時間、改進膜處理步驟、調整抗體濃度和改善洗滌步驟。
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