轉膜marker顏色很淺 且感覺條帶飛了 是爲什麼

WB轉膜出現以上情況可能是由下面幾個因素造成的：




1.膜轉移效率不足：

如果膜轉移效率不高，可能會導致marker顏色淺。這可能是由於電轉膜的電壓或時間設定不當，或者使用的膜與蛋白質的親和力不足。




2.樣品過載或電泳條件不當：

如果樣品載入過多或電泳條件不適宜（如電壓過高或執行時間過長），可能導致蛋白質條帶在凝膠中遷移不均勻，導致轉膜後條帶模糊或“飛了”。




3.膜處理不當：

在轉膜過程中，膜的處理也非常重要。例如，PVDF膜需要預溼化處理，而NC或者其他型別的膜可能有不同的處理要求。處理不當可能影響蛋白質的轉移效率和結合效果。




4.染色或檢測問題：

如果使用的染色方法或檢測技術不敏感，也可能導致條帶顏色淺。此外，染色時間過短或過長都可能影響結果。




5.膜儲存不當：

如果轉膜後的膜儲存不當，可能會導致蛋白質降解或者膜的性質改變，從而影響檢測效果。




爲了解決這些問題，你可以嘗試以下措施：




• 檢查電轉膜裝置的設定，確保電壓和時間適宜。
• 調整樣品的載入量和電泳條件。
• 確保膜的正確處理和適宜的蛋白質轉移條件。
• 最佳化染色和檢測步驟，確保足夠的靈敏度。
• 適當儲存膜，避免蛋白質降解。




如果上述措施仍然無法解決問題，可能需要更詳細地檢查整個實驗流程，包括樣品的製備、電泳條件、轉膜系統的選擇和操作，以及後續的染色和檢測步驟。




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