N糖基化位點分析
N- 糖基化(N-glycosylation)是真核生物體內一種常見的糖基化修飾形式,在糖基轉移酶的作用下,寡糖鏈與蛋白質上的特定氨基酸殘基—天冬醯胺之間形成醯胺鍵,從而結合到蛋白質上。N-糖基化位點即發生N-糖基化修飾的氨基酸位點,N-糖基化位點分析透過蛋白質酶解和質譜技術,識別並定位蛋白質中發生N-糖基化的特定氨基酸殘基,分析結果可揭示蛋白質的結構和功能,這對於保證生物製品發揮正常功能至關重要。對N-糖基化位點的深入分析有望揭示更多的生物學奧秘並指導新藥物的開發。
百泰派克生物科技BTP透過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證。公司基於穩定、高效的液相色譜高分辨質譜(LC-MS/MS)開發了一系列糖基化表徵方法,為您提供高質量的一站式N糖基化位點分析服務,包括N糖鏈分析、N糖基化位點鑑定以及糖肽解析的完整分析流程。歡迎免費諮詢,瞭解更多詳情!
實驗儀器
• NanoLC: Vanquish NEO
• MS: Orbitrap Fusion Lumos
案例示意
利用在重水中使用PNGase F來釋放糖鏈並標記18O的方法進行N-糖基化位點分析。首先,根據蛋白質的理論氨基酸序列資訊,選擇適當的蛋白酶將蛋白質切割成肽段。待溶劑揮發後,我們在重水中進行切糖處理。然後,透過液相色譜-高分辨質譜技術,我們能夠確定帶有18O修飾的N-糖基化位點所在的肽段,從而確定N-糖基化的位置。
圖2 N糖基化位點二級圖
注:圖中N糖基化修飾在肽段第八位氨基酸上,分子量變化為+2.988,橫座標為質荷比,縱座標為訊號強度
中/英文專案報告
在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜引數(中英文)
3. N糖基化位點分析詳細資訊
4. 質譜圖片
5. 原始資料
N糖基化位點分析一站式服務
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