未知蛋白測序
蛋白質的氨基酸序列是決定蛋白質結構和功能的基礎,蛋白測序即對組成蛋白質的氨基酸種類和排列順進行測定,是蛋白組學研究中的重要內容,常見方法包括質譜法(如串聯質譜)和Edman降解法。未知蛋白(unknown protein)通常是指那些尚未被充分研究和描述的蛋白質。這些蛋白質可能是由新發現的基因編碼的,或者是已知生物體中的基因產物,但其結構、功能和作用尚未被完全理解。未知蛋白測序有助於揭示生物體的基因組和蛋白質組的全貌,對於研究蛋白質結構與功能,促進生物技術、藥物開發和疾病診斷等領域的進步具有關鍵意義。
百泰派克生物科技BTP基於Thermo公司最新推出的Obitrap Exploris 240質譜儀實現未知蛋白樣品的序列分析,採用常用的6種蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)分別對靶蛋白進行酶切和質譜測定,在得到碎裂肽段片段的同時,經過肽段之間的拼接完成蛋白序列100%的測定。
百泰派克生物科技BTP未知蛋白測序流程
1.樣品準備:
提取蛋白質,並透過純化過程去除雜質。
2.蛋白分級/分離:
將蛋白質樣品進行分級或分離,通常採用一維或二維凝膠電泳(1D/2D-PAGE)以及液相色譜(如HPLC)等方法。
3.蛋白酶切/消化:
透過多重酶解(如Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)將蛋白質分解成較小的肽段,便於後續進行質譜分析。
4.肽段分離:
採用液相色譜(如反相高效液相色譜,RP-HPLC)將蛋白酶切後得到的肽段進一步分離。
5.質譜分析:
將肽段透過質譜儀進行分析,質譜分析的結果可以獲得肽段的質量、電荷狀態等資訊。
6.肽段測序:
透過串聯質譜(如MS/MS)對肽段進行進一步的測序。
7.數據處理與分析:
使用專門的質譜軟體如Mascot、Sequest 等結合已知的蛋白質資料庫對質譜資料進行分析處理。
未知蛋白測序技術的主要應用
1.新蛋白質的發現:
透過對未知蛋白質的測序和功能註解,可以發現新的生物催化劑、訊號傳導蛋白、轉錄因子等分子功能。
2.蛋白質功能研究:
透過測序蛋白質,為功能註釋和蛋白質互作用網路研究提供資料支援。
3.疾病標誌物發現:
透過對病理和正常組織蛋白質組的比較,發現潛在的疾病標誌物,為疾病診斷和治療提供線索。
4.藥物研發:
用於鑑定藥物作用的靶標蛋白,找到新的藥物靶點,有助於加速新藥的研發和最佳化。
關於樣品
我們接受以下型別的樣品:
1.純化蛋白質:請提供純度大於85%的蛋白質樣品,建議送樣量為50-200ug,蛋白濃度應在0.1-1mg/mL之間。
2.蛋白質組提取物:包括但不限於來源於細胞、組織或生物體的蛋白質組提取物。建議送樣量為200-500ug,蛋白濃度應在1-5mg/mL之間。
3.蛋白膠點/膠條:1D-SDS PAGE分離的蛋白膠條,2DE PAGE中的蛋白膠點,IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物。對於膠點膠條請保證蛋白質含量至少為10ng,對於免疫沉澱樣本,請提供至少20ug的蛋白質。
中/英文專案報告
在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜引數(中英文)
3. 未知蛋白測序詳細資訊
4. 質譜圖片
5. 原始資料
未知蛋白測序一站式服務
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告
相關服務
How to order?