未知蛋白測序

    蛋白質的氨基酸序列是決定蛋白質結構和功能的基礎,蛋白測序即對組成蛋白質的氨基酸種類和排列順進行測定,是蛋白組學研究中的重要內容,常見方法包括質譜法(如串聯質譜)和Edman降解法。未知蛋白(unknown protein)通常是指那些尚未被充分研究和描述的蛋白質。這些蛋白質可能是由新發現的基因編碼的,或者是已知生物體中的基因產物,但其結構、功能和作用尚未被完全理解。未知蛋白測序有助於揭示生物體的基因組和蛋白質組的全貌對於研究蛋白質結構與功能,促進生物技術、藥物開發和疾病診斷等領域的進步具有關鍵意義。

    百泰派克生物科技BTP基於Thermo公司最新推出的Obitrap Exploris 240質譜儀實現未知蛋白樣品的序列分析,採用常用的6種蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)分別對靶蛋白進行酶切和質譜測定,在得到碎裂肽段片段的同時,經過肽段之間的拼接完成蛋白序列100%的測定。

    百泰派克生物科技BTP未知蛋白測序流程

    1.樣品準備:

    提取蛋白質,並透過純化過程去除雜質。


    2.蛋白分級/分離:

    將蛋白質樣品進行分級或分離,通常採用一維或二維凝膠電泳(1D/2D-PAGE)以及液相色譜(如HPLC)等方法。


    3.蛋白酶切/消化:

    透過多重酶解(如Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N將蛋白質分解成較小的肽段,便於後續進行質譜分析


    4.肽段分離:

    採用液相色譜(如反相高效液相色譜,RP-HPLC)將蛋白酶切後得到的肽段進一步分離。


    5.質譜分析:

    將肽段透過質譜儀進行分析,質譜分析的結果可以獲得肽段的質量、電荷狀態等資訊。


    6.肽段測序:

    透過串聯質譜(如MS/MS)對肽段進行進一步的測序。


    7.數據處理與分析:

    使用專門的質譜軟體如Mascot、Sequest 等結合已知的蛋白質資料庫對質譜資料進行分析處理。


    未知蛋白測序技術的主要應用

    1.新蛋白質的發現:

    透過對未知蛋白質的測序和功能註解,可以發現新的生物催化劑、訊號傳導蛋白、轉錄因子等分子功能。


    2.蛋白質功能研究:

    透過測序蛋白質,為功能註釋和蛋白質互作用網路研究提供資料支援。


    3.疾病標誌物發現

    透過對病理和正常組織蛋白質組的比較,發現潛在的疾病標誌物,為疾病診斷和治療提供線索。


    4.藥物研發:

    用於鑑定藥物作用的靶標蛋白,找到新的藥物靶點有助於加速新藥的研發和最佳化。


    關於樣品

    我們接受以下型別的樣品:

    1.純化蛋白質:請提供純度大於85%的蛋白質樣品,建議送樣量為50-200ug,蛋白濃度應在0.1-1mg/mL之間


    2.蛋白質組提取物:包括但不限於來源於細胞、組織或生物體的蛋白質組提取物。建議送樣量為200-500ug,蛋白濃度應在1-5mg/mL之間。


    3.蛋白膠點/膠條:1D-SDS PAGE分離的蛋白膠條,2DE PAGE中的蛋白膠點,IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物。對於膠點膠條請保證蛋白質含量至少為10ng,對於免疫沉澱樣本,請提供至少20ug的蛋白質。


    中/英文專案報告

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)

    2. 相關的質譜引數(中英文)

    3. 未知蛋白測序詳細資訊

    4. 質譜圖片

    5. 原始資料


    未知蛋白測序一站式服務

    您只需下單-寄送樣品

    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告


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