互作蛋白質譜鑑定
互作蛋白質譜鑑定是一種利用質譜技術研究蛋白質相互作用的方法,其透過免疫(共)沉澱、親和純化等方法分離目標蛋白質複合物;再利用蛋白質酶消化產生肽段,使用液相色譜-質譜聯用技術(LC-MS/MS)分析肽段;最後,基於質譜資料,結合生物資訊學工具,鑑定和定量互作蛋白。互作蛋白質譜鑑定可以鑑定或驗證相互作用的蛋白質,發現與目標蛋白相互作用的新蛋白,鑑定和定量互作蛋白,並揭示生物體內蛋白質訊號傳導通路,助力藥物靶點發現和生物標誌物研究,為藥物開發提供依據。
百泰派克生物科技BTP基於Thermo Fisher的Orbitrap Exploris 240質譜平臺結合Nano-LC的一站式互作蛋白質譜鑑定服務,可對IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物的質譜鑑定分析,蛋白質樣品的鑑定前處理過程嚴格按照Nature Methods發表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis進行,保證鑑定試驗中得到更高的肽段覆蓋率。
百泰派克生物科技BTP互作蛋白質譜鑑定流程
1.蛋白質提取:
採用最佳的方法從細胞或組織樣本中提取蛋白質,並測定蛋白質純度和濃度,確保提取物的質量。
2.互作蛋白獲取:
根據實驗需求利用免疫(共)沉澱、(GST)Pull-down或免疫印跡方法,富集目標蛋白質及其互作蛋白。
3.洗脫和富集:
將目標蛋白質複合物從結合介質上洗脫、富集並收集蛋白質樣品以便進行下一步的質譜分析。
4.蛋白質酶解:
將洗脫後的互作蛋白質組樣品用多種蛋白酶(如胰蛋白酶)進行酶解,生成肽段。
6.肽段分離與純化:
利用高效液相色譜(HPLC)或反相高效液相色譜(RP-HPLC)技術對酶解後的肽段進行分離和純化 。
7.質譜分析:
透過液質聯用(LC-MS/MS)對肽段進行質譜分析,獲得質譜資料。
8.數據處理與分析:
對質譜資料進行資料庫搜尋、生物資訊學分析,定性定量鑑定互作蛋白質。
我們的優勢
1.高靈敏度與高準確度:
我們的質譜技術能夠在複雜的生物樣品中準確的檢測到互作蛋白質,即使是低丰度的互作蛋白質也可以被鑑定,具有很高的靈敏度。
2.高通量:
質譜技術能夠在短時間內鑑定和定量大量的蛋白質,為研究者節省時間和實驗成本。
3.多樣的蛋白質互作型別:
我們的服務涵蓋多種蛋白質互作型別,包括同源互作、異源互作、瞬時互作和永久性互作等。
4.相對無偏倚性:
相比傳統的基因晶片和酵母雙雜交等技術,質譜技術在檢測蛋白質互作時具有相對較低的偏倚性。
5.多適用性:
質譜技術可以應用於各種生物體系,如細菌、酵母、植物、動物和人類,為多種生物領域的研究提供支援。
6.結構資訊豐富:
質譜技術可以提供蛋白質的翻譯後修飾、剪下、蛋白-蛋白互作等多方面的結構資訊,幫助研究者深入瞭解蛋白質功能和調控機制。
關於樣品
1.總蛋白質提取物:可以從細胞、組織或生物體中提取。建議提供至少100 µg的蛋白質以確保實驗成功。
2.富集蛋白質:對於特定目標蛋白質的互作蛋白質鑑定,您可以提供經IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物。建議至少提供 50 ug富集蛋白質。
中/英文專案報告
在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜引數(中英文)
3. 互作蛋白質譜鑑定詳細資訊
4. 質譜圖片
5. 原始資料
互作蛋白質譜鑑定一站式服務
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告
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