互作蛋白質譜鑑定

    互作蛋白質譜鑑定是一種利用質譜技術研究蛋白質相互作用的方法,其透過免疫沉澱、親和純化等方法分離目標蛋白質複合物;利用蛋白質酶消化產生肽段,使用液相色譜-質譜聯用技術(LC-MS/MS)分析肽段;最後,基於質譜資料,結合生物資訊學工具,鑑定和定量互作蛋白。互作蛋白質譜鑑定可以鑑定或驗證相互作用的蛋白質,發現與目標蛋白相互作用的新蛋白,鑑定和定量互作蛋白,並揭示生物體內蛋白質訊號傳導通路,助力藥物靶點發現和生物標誌物研究,為藥物開發提供依據

     

    百泰派克生物科技BTP基於Thermo Fisher的Orbitrap Exploris 240質譜平臺結合Nano-LC的一站式互作蛋白質譜鑑定服務,可對IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物的質譜鑑定分析,蛋白質樣品的鑑定前處理過程嚴格按照Nature Methods發表的文章:Universal sample preparation method for proteome analysis進行,保證鑑定試驗中得到更高的肽段覆蓋率。

     

    百泰派克生物科技BTP互作蛋白質譜鑑定流程

    1.蛋白質提取:

    採用最佳的方法從細胞或組織樣本中提取蛋白質,並測定蛋白質純度和濃度,確保提取物的質量

     

    2.互作蛋白獲取

    根據實驗需求利用免疫沉澱、(GST)Pull-down免疫印跡方法,富集目標蛋白質及其互作蛋白。

     

    3.洗脫和富集

    將目標蛋白質複合物從結合介質上洗脫、富集並收集蛋白質樣品以便進行下一步的質譜分析。

     

    4.蛋白質酶

    洗脫後的互作蛋白質組樣品用多種蛋白酶(如胰蛋白酶)進行酶解,生成肽段。

     

    6.肽段分離與純化

    利用高效液相色譜(HPLC)或反相高效液相色譜RP-HPLC)技術對酶解後的肽段進行分離和純化 。

     

    7.質譜分析:

    透過液質聯用(LC-MS/MS)對肽段進行質譜分析,獲得質譜資料。

     

    8.數據處理與分析:

    對質譜資料進行資料庫搜尋、生物資訊學分析,定性定量鑑定互作蛋白

     

    我們的優勢

    1.高靈敏度與高準確度

    我們的質譜技術能夠在複雜的生物樣品中準確的檢測到互作蛋白質,即使是低丰度的互作蛋白質也可以被鑑定具有很高的靈敏度。

     

    2.高通量:

    質譜技術能夠在短時間內鑑定和定量大量的蛋白質,為研究者節省時間和實驗成本。

     

    3.多樣的蛋白質互作型別

    我們的服務涵蓋多種蛋白質互作型別,包括同源互作、異源互作、瞬時互作和永久性互作等。

     

    4.相對無偏倚性

    相比傳統的基因晶片和酵母雙雜交等技術,質譜技術在檢測蛋白質互作時具有相對較低的偏倚性。

     

    5.多適用性

    質譜技術可以應用於各種生物體系,如細菌、酵母、植物、動物和人類,為多種生物領域的研究提供支援。

     

    6.結構資訊豐富:

    質譜技術可以提供蛋白質的翻譯後修飾、剪下、蛋白-蛋白互作等多方面的結構資訊,幫助研究者深入瞭解蛋白質功能和調控機制。

     

    關於樣品

    1.總蛋白質提取物:可以從細胞、組織或生物體中提取。建議提供至少100 µg的蛋白質以確保實驗成功

     

    2.富集蛋白質:對於特定目標蛋白質的互作蛋白質鑑定,您可以提供經IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物。建議至少提供 50 ug富集蛋白質。

     

    中/英文專案報告

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜引數(中英文)
    3. 互作蛋白質譜鑑定詳細資訊
    4. 質譜圖片
    5. 原始資料

     

    互作蛋白質譜鑑定一站式服務

    您只需下單-寄送樣品
    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告

     

    相關服務

    Pull-down靶蛋白質譜鑑定
    蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
    蛋白質相互作用質譜分析
    免疫共沉澱法(CO-IP)結合質譜聯用的蛋白互作分析
    GST融合蛋白Pull-down技術結合質譜聯用的蛋白互作分析
    SILAC與免疫共沉澱結合質譜聯用的蛋白互作分析
    蛋白質相互作用分析
    蛋白質質譜鑑定

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