蛋白質串聯質譜鑑定
蛋白質串聯質譜技術(Tandem Mass Spectrometry,MS/MS)是一種基於質譜技術的高效、精準、靈敏的蛋白質定性、定量鑑定方法,廣泛應用於蛋白質組學研究、生物藥品質量控制、疾病標誌物發現等領域。其透過對蛋白質的酶解產物(肽段)進行質譜分析,實現目標蛋白質的鑑定,包括對未知蛋白質的鑑定。該技術產生於20世紀90年代初,起初以液相色譜與質譜聯用為主(LC-MS/MS),隨著基質輔助鐳射解吸電離(MALDI)等技術發展,蛋白質質譜鑑定進入了一個新時代。現如今串聯質譜技術已成為蛋白質組學研究的重要手段,對於解析複雜生物樣品中蛋白質結構與功能具有重要意義,有助於揭示生物體內蛋白質相互作用、訊號傳導機制,推動生物科學的發展和疾病治療的進步。
百泰派克生物科技BTP蛋白質串聯質譜鑑定技術流程
1.樣品準備:
根據實際情況選擇合適的方法(如高效液相色譜或凝膠電泳等)對客戶提供的蛋白質樣品進行純化、濃縮和脫鹽處理,以去除雜質並提高蛋白質純度。
2.蛋白質酶解:
將純化的蛋白質進行多重酶解,將蛋白質切割成多肽片段,便於後續質譜分析。
3.肽段分離:
採用奈米高效液相色譜(nano-HPLC)對肽段進行分離,有效提高解析度和檢測靈敏度。
4.串聯質譜分析:
我們採用高解析度、高靈敏度的質譜儀(Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺,Orbitrap Fusion質譜平臺,Orbitrap Fusion Lumos,Orbitrap Exploris 240)透過串聯質譜(MS/MS)對分離的肽段進行質量和碎片離子分析。
5.資料分析:
採用專業的數據處理軟體Mascot和蛋白質資料庫進行肽段的質量匹配和碎片離子搜尋,最終實現蛋白質鑑定,包括蛋白質名稱、氨基酸序列、匹配得分等詳細資訊。
蛋白質串聯質譜鑑定技術的主要應用
1.高通量蛋白質鑑定:
串聯質譜在蛋白質組學研究中發揮著關鍵作用,用於鑑定和定量生物樣品中的蛋白質,揭示蛋白質的表達差異、相互作用和功能。
2.翻譯後修飾研究:
用於鑑定蛋白質的翻譯後修飾(如磷酸化、乙醯化、糖基化等),揭示修飾對蛋白質功能和訊號傳導的影響。
3.蛋白質相互作用研究:
透過鑑定蛋白質複合物中的組分,揭示蛋白質間的相互作用關係,為生物訊號通路研究提供依據。
4.蛋白質結構分析:
MS/MS技術可以分析蛋白質的一級結構(氨基酸序列)和部分二級、三級結構資訊,為蛋白質結構研究提供參考資料。
5.疾病診斷和生物標誌物研究:
MS/MS技術可以用於疾病相關蛋白質的鑑定和定量,為疾病診斷和預後評估提供依據。
關於樣品
樣本型別 |
細胞裂解物 |
組織提取物 |
體液樣品 |
基因表達產物 |
蛋白質複合物 |
樣本數量 |
50-200ug |
100-500ug |
10-100ug |
1-10ug |
5-50ug |
中/英文專案報告
在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜引數(中英文)
3. 蛋白質串聯質譜鑑定詳細資訊
4. 質譜圖片
5. 原始資料
蛋白質串聯質譜鑑定一站式服務
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告
相關服務
How to order?