蛋白質串聯質譜鑑定

    蛋白質串聯質譜技術(Tandem Mass Spectrometry,MS/MS)是一種基於質譜技術的高效、精準、靈敏蛋白質定性、定量鑑定方法,廣泛應用於蛋白質組學研究、生物藥品質量控制、疾病標誌物發現等領域透過對蛋白質的酶解產物(肽段)進行質譜分析,實現目標蛋白質的鑑定,包括對未知蛋白質的鑑定。該技術產生於20世紀90年代初,起初以液相色譜與質譜聯用為主(LC-MS/MS),隨著基質輔助鐳射解吸電離(MALDI)等技術發展,蛋白質質譜鑑定進入了一個新時代。現如今串聯質譜技術已成為蛋白質組學研究的重要手段,對於解析複雜生物樣品中蛋白質結構與功能具有重要意義有助於揭示生物體內蛋白質相互作用、訊號傳導機制,推動生物科學的發展和疾病治療的進步。

     

    百泰派克生物科技BTP蛋白質串聯質譜鑑定技術流程

    1.樣品準備

    根據實際情況選擇合適的方法(如高效液相色譜或凝膠電泳等)對客戶提供的蛋白質樣品進行純化、濃縮和脫鹽處理,以去除雜質並提高蛋白質純度

     

    2.蛋白質酶解:

    純化的蛋白質進行多重酶解,將蛋白質切割成多肽片段,便於後續質譜分析。

     

    3.肽段分離:

    採用奈米高效液相色譜(nano-HPLC)對肽段進行分離,有效提高解析度和檢測靈敏度。

     

    4.串聯質譜分析:

    我們採用高解析度、高靈敏度的質譜儀(Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺,Orbitrap Fusion質譜平臺,Orbitrap Fusion Lumos,Orbitrap Exploris 240)透過串聯質譜(MS/MS)對分離的肽段進行質量和碎片離子分析。

     

    5.資料分析

    採用專業的數據處理軟體Mascot和蛋白質資料庫進行肽段的質量匹配和碎片離子搜尋,最終實現蛋白質鑑定,包括蛋白質名稱、氨基酸序列、匹配得分等詳細資訊

     

    蛋白質串聯質譜鑑定技術的主要應用

    1.高通量蛋白質鑑定:

    串聯質譜在蛋白質組學研究中發揮著關鍵作用,用於鑑定和定量生物樣品中的蛋白質,揭示蛋白質的表達差異、相互作用和功能。

     

    2.翻譯後修飾研究:

    用於鑑定蛋白質的翻譯後修飾(如磷酸化、乙醯化、糖基化等),揭示修飾對蛋白質功能和訊號傳導的影響。

     

    3.蛋白質相互作用研究:

    透過鑑定蛋白質複合物中的組分,揭示蛋白質間的相互作用關係,為生物訊號通路研究提供依據。

     

    4.蛋白質結構分析:

    MS/MS技術可以分析蛋白質的一級結構(氨基酸序列)和部分二級、三級結構資訊,為蛋白質結構研究提供參考資料。

     

    5.疾病診斷和生物標誌物研究:

    MS/MS技術可以用於疾病相關蛋白質的鑑定和定量,為疾病診斷和預後評估提供依據。

     

    關於樣品

    樣本型別

    細胞裂解物

    組織提取物

    體液樣品

    基因表達產物

    蛋白質複合物

    樣本數量

    50-200ug

    100-500ug

    10-100ug

    1-10ug

    5-50ug


    中/英文專案報告

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜引數(中英文)
    3. 蛋白質串聯質譜鑑定詳細資訊
    4. 質譜圖片
    5. 原始資料

     

    蛋白質串聯質譜鑑定一站式服務

    您只需下單-寄送樣品
    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告

     

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    翻譯後修飾蛋白組分析

    蛋白質相互作用質譜分析

    定量蛋白組分析

    蛋白質相互作用分析

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